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當前位置：

Lonza LT07-710 MycoAlert? PLUS 支原體檢測試劑盒使用指南

導(dǎo)讀

由干細胞搜丨干細胞搜網(wǎng)編輯： MycoAlert? PLUS Assay是一種精選生物化學(xué)檢測方法，用于檢測細胞培養(yǎng)過程中的支原體污染問題。支原體是一種能夠自我復(fù)制的最小的原核微生物，和其他細菌不同的是它們沒有細胞壁，所以細胞形態(tài)不固定，可以有多種變化，可以在培養(yǎng)基上形成極小的菌落。支原體是寄生生物，但同時也具有腐生功能。細胞培養(yǎng)過程中的污染支原體會使細胞生長變慢，影響細胞活性變化。

產(chǎn)品名稱：MycoAlert? PLUS 支原體檢測試劑盒

產(chǎn)品貨號：?LT07-710

 

 

產(chǎn)品介紹：
MycoAlert? PLUS Assay是一種精選生物化學(xué)檢測方法，用于檢測細胞培養(yǎng)過程中的支原體污染問題。支原體是一種能夠自我復(fù)制的最小的原核微生物，和其他細菌不同的是它們沒有細胞壁，所以細胞形態(tài)不固定，可以有多種變化，可以在培養(yǎng)基上形成極小的菌落。支原體是寄生生物，但同時也具有腐生功能。細胞培養(yǎng)過程中的污染支原體會使細胞生長變慢，影響細胞活性變化。新一代MycoAlert? PLUS Assay可以檢測出所有6種支原體屬，多達180種支原體。與MycoAlert?支原體檢測試劑盒相比有更高的靈敏度和準確性。操作簡單快速，只需兩步移液操作，20分鐘內(nèi)就可得出結(jié)果。適合用于檢測的樣品包括細胞上清液、未啟用培養(yǎng)基、10%-20% FCS或FBS、L-谷氨酰胺、青霉素-鏈霉素混合物、中性胰蛋白酶、慶大霉素/兩性霉素B等。

 

檢測原理

檢測樣品中的活性支原體裂解后，釋放出的酶與MycoAlert? PLUS Substrate反應(yīng)，催化ADP轉(zhuǎn)化為ATP。加入MycoAlert? PLUS　Reagent試劑后在熒光素酶作用下ATP產(chǎn)生光信號(ATP+ Luciferin + O2 →Oxyluciferin + AMP + PPi + CO2 + LIGHT)。光信號可用光度計讀出，根據(jù)第二次讀數(shù)(Read B)與次讀數(shù)(Read A)比率可是確定是否存在支原體污染。Read B/Read A比率<1, 支原體陰性，無支原體；1-1.2，不確定是否存在支原體，需重新檢測；>1.2，支原體陽性，存在支原體污染。

 

產(chǎn)品優(yōu)點：
? 生物發(fā)光技術(shù)，無需DNA提取物
? 樣品檢測只需兩步移液操作，結(jié)果分析簡單
? 可以和低靈敏性的板光度計或多功能讀數(shù)器配用
? 可用于檢測未啟用培養(yǎng)基，培養(yǎng)基補充物或水溶液
? 快速方便，標準程序20分鐘就可出結(jié)果
? 通用性強，可檢測所有常見的支原體污染(不含脲原體屬)

 

組成成份：
? MycoAlert? PLUS 試劑（凍干） 1 x 10 ml (LT27-286)
? MycoAlert? PLUS 底物（凍干） 1 x 10 ml (LT27-289)
? MycoAlert? PLUS 檢測緩沖液 　1 x 20 ml (LT27-292)

 

 

 

支原體檢測試劑盒(MycoAlert?Mycoplasma?Detection?Kit)?定義：支原體（mycoplasma），又稱霉形體，沒有細胞壁的原核生物，為目前發(fā)現(xiàn)的最小的原核生物。支原體細胞中*可見的細胞器是核糖體（支原體是原核細胞，原核細胞的細胞器只有核糖體）。它對許多抗生素具有抗性，如類胸膜肺炎微生物。

一.支原體污染成為細胞培養(yǎng)的重大隱患:?

1．研究表明，世界范圍內(nèi)超過15%的培養(yǎng)細胞都有支原體污染。

2．支原體污染會對細胞造成多方面的影響，包括代謝、免疫或生化特性、生長狀況、以及細胞存活等多方面的改變。

3．支原體污染會影響實驗結(jié)果的穩(wěn)定性、可靠性和準確性。

4．支原體難以檢測，同時也很難消除。支原體能輕易地通過標準濾膜，同時也能拮抗絕大多數(shù)的抗生素，給細胞培養(yǎng)造成巨大損失。

二.常規(guī)檢測才能有效避免細胞支原體污染:

1．常規(guī)性的進行支原體檢測是保證細胞培養(yǎng)中不受到支原體污染影響的*途徑。

2．傳統(tǒng)的支原體檢測方法需要在特殊的選擇性培養(yǎng)基作用下對樣品進行培養(yǎng)，時間往往達數(shù)周，費時，費力并且無法獲得足夠的靈敏度和特異性。

三、檢測原理

美國Lonza?MycoAlert?Mycoplasma?Detection?Kit支原體檢測試劑盒是利用支原體酶的這一特定活性，進行選擇性的生物化學(xué)檢測。這些酶的存在提供了一種快速的篩選操作，能靈敏地檢測出樣本中的支原體污染。這些存活的支原體被溶解，然后釋放出來的酶與支原體檢測試劑盒中提供的底物發(fā)生催化反應(yīng)，將ADP轉(zhuǎn)化成ATP。通過測量樣品中添加底物前后ATP的含量，可以得到一個比率，該比率指示支原體是否存在。如果這些酶不存在，第二次讀數(shù)相對于讀數(shù)就沒有增加；如果酶與底物進行特異性反應(yīng)，就會導(dǎo)致ATP含量上升。ATP含量的上升通過生物發(fā)光化學(xué)反應(yīng)可以檢測到，其公式如下：Luciferase?ATP?+?Luciferin?+?O2?——————>?Oxyluciferin?+?AMP?Mg?2+?+?PPi?+?CO2?+?LIGHT這個反應(yīng)的發(fā)生是在室溫(18°C～22°C)進行的，也是熒光素酶反應(yīng)的*溫度。在支原體檢測試劑盒的檢測原理中，*通過分光光度計讀數(shù)，由于發(fā)出光的強度與ATP的濃度成線性關(guān)系，因此可檢測支原體的污染問題。

Lonza支原體檢測試劑盒的產(chǎn)品特征Lonza?MycoAlert?Mycoplasma?Detection?Kit支原體檢測試劑盒是專門檢測細胞培養(yǎng)過程中是否被支原體污染的經(jīng)典試劑盒，它包含檢測所用到的各種試劑和產(chǎn)品操作手冊。該支原體檢測試劑盒具有操作簡單、快速高效、結(jié)果穩(wěn)定可靠、靈敏度極高等優(yōu)點，讓您在支原體檢測時輕松容易，并確保您的培養(yǎng)潔凈無污染。

四.推薦Lonza（原Cambrex）公司?MycoAlert?支原體檢測試劑盒:采用發(fā)光檢測，更能快速反映細胞培養(yǎng)中的支原體污染。避免支原體造成的損害，省力。

1．快速–20分鐘就可以得到結(jié)果。

2．敏感度–可檢測極少量的支原體。

3．簡易–僅混合2種試劑和您的樣品，將2種讀數(shù)放到照度計上就可以得到確切結(jié)果。

4．完整–試劑盒包括檢測用所需要的全部試劑！

 

訂購信息：

? 貨號? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?描述

? LT07-701?MycoAlert? PLUS Mycoplasma Detection Kit, 10Tests
? LT07-703?MycoAlert? PLUS Mycoplasma Detection Kit, 30Tests
? LT07-705?MycoAlert? PLUS Mycoplasma Detection Kit, 50Tests
? LT07-710?MycoAlert? PLUS Mycoplasma Detection Kit, 100Tests
? LT07-518?MycoAlert? Assay Control Sets, 10Tests
? LT27-292?MycoAlert? Assay Buffer, 20ml

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