• 分 子 式: C52H59ClN4O19
• 分 子 量: 1079.49
• 外      觀: 暗紫色固體
• 別      名: Rhod 2-AM
• 純      度:
• 儲(chǔ)存條件: -20℃
• 運(yùn)輸條件: 室溫

Rhod 2-AM 的產(chǎn)品特性
在所有的鈣離子指示劑中，Rhod 2熒光信號的波長最長。它具有和羅丹明類似的激發(fā)和發(fā)射波長，分別為557 nm和581 nm。這樣的激發(fā)波長使得我們很容易就能找到氬和氪光源的激光。盡管有人認(rèn)為Rhod 2的熒光信號僅僅將鈣復(fù)合物的熒光增加了數(shù)倍，但是Dojindo的Rhod 2由于具有很高的純度，能有效地將鈣熒光信號增加80-100倍左右，使得它的信號強(qiáng)度在所有的鈣離子探針里面是最強(qiáng)的。所以，我們強(qiáng)烈建議使用Rhod 2作為探針用激光顯微鏡來檢測細(xì)胞內(nèi)的鈣離子情況。有報(bào)道稱，特別是在神經(jīng)組織切片培養(yǎng)方面，Rhod 2具有定位點(diǎn)的輪廓線更加清晰的特點(diǎn)。Rhod 2和鈣離子的解離常數(shù)為（Kd＝1.0 mM），在所有的鈣離子熒光探針中是最高的，為監(jiān)測鈣離子濃度提供了一個(gè)廣闊的范圍。Rhod 2-AM是一種Rhod 2的乙酰甲酯衍生物，能非常容易的通過AM法負(fù)載到細(xì)胞內(nèi)。

Rhod 2-AM 的操作說明(for Human T cells)
試劑:
2 mM的Rhod 2-AM/DMSO (將1 mg Rhod 2-AM溶于442 µl DMSO)
Pluronic F127
Hanks' balanced salt solution (HBSS)
HEPES buffer saline (10 mM HEPES, 1 mM Na2HPO4, 137 mM NaCl, 5 mM KCl, 1 mM CaCl2, 0.5 mM MgCl2, 5 mM glucose, 0.1% BSA, pH 7.4)
操作:
1. 向Rhod 2-AM/DMSO溶液中加入16.5 mg Pluronic F127，Pluronic F127可以防止Rhod 2-AM在HBSS中聚合并能幫助其進(jìn)入細(xì)胞。
2. 用HBSS稀釋Rhod 2-AM溶液，制備4 µM的Rhod 2-AM working solution。
3. 將Rhod 2-AM working solution加入細(xì)胞，在37 ℃培養(yǎng)20分鐘。
4. 加入5倍體積的含有1%胎牛血清的HBSS，再繼續(xù)培養(yǎng)40分鐘。
5. 用HEPES buffer saline洗滌細(xì)胞3次，然后用HEPES buffer saline使細(xì)胞重懸浮，制成1x105 cells/ml的溶液。
6. 37 ℃下培養(yǎng)10 分鐘，然后用該細(xì)胞進(jìn)行熒光鈣離子檢測。
7. 激發(fā)波長和發(fā)射波長分別為557nm和581nm。
*標(biāo)記的條件因細(xì)胞種類而異，在每次實(shí)驗(yàn)前，請先確定最佳條件。以上方法僅供參考。