人原代T細(xì)胞在免疫學(xué)研究和細(xì)胞治療中具有重要應(yīng)用。ProteanFect作為一種高效的轉(zhuǎn)染試劑，特別適用于人原代T細(xì)胞的基因遞送，能夠?qū)崿F(xiàn)外源基因的高效表達(dá)。本文將詳細(xì)介紹使用ProteanFect進(jìn)行人原代T細(xì)胞轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)攻略。
原代T細(xì)胞的分離
從全血或血沉棕黃層的單核細(xì)胞（MNCs）或外周血單核細(xì)胞（PBMCs）開始，通過(guò)陰性選擇或陽(yáng)性選擇分離得到T細(xì)胞亞群，包括CD3+ T細(xì)胞、CD4+ T細(xì)胞或CD8+ T細(xì)胞。
原代T細(xì)胞的活化
使用CD3/CD28激活磁珠提供T細(xì)胞激活與擴(kuò)增所需的刺激信號(hào)，顯著提高T細(xì)胞的活化和擴(kuò)增效率。
培養(yǎng)與傳代
轉(zhuǎn)染操作
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
使用ProteanFect Max遞送EGFP mRNA至人原代T細(xì)胞，可以在24小時(shí)后觀察到強(qiáng)烈的EGFP表達(dá)。通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)分析，轉(zhuǎn)染后不同時(shí)間點(diǎn)（0.2天、1天、3天、6天、9天、12天）的EGFP陽(yáng)性細(xì)胞比例均保持在高水平，顯示出ProteanFect Max在人原代T細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)持久基因表達(dá)的能力。
| 產(chǎn)品名稱 |
貨號(hào) |
單位規(guī)格（試劑B） |
| ProteanFect轉(zhuǎn)染試劑盒 |
PT0100 |
0.02 mL |
| ProteanFect轉(zhuǎn)染試劑盒 |
PT0101 |
0.1 mL |
| ProteanFect轉(zhuǎn)染試劑盒 |
PT0103 |
0.3 mL |
| ProteanFect轉(zhuǎn)染試劑盒 |
PT0105 |
0.5 mL |
| ProteanFect轉(zhuǎn)染試劑盒 |
PT0110 |
1.0 mL |
| ProteanFectMax轉(zhuǎn)染試劑盒 |
PT0200 |
0.02 mL |
| ProteanFectMax轉(zhuǎn)染試劑盒 |
PT0201 |
0.1 mL |
| ProteanFectMax轉(zhuǎn)染試劑盒 |
PT0202 |
0.2 mL |
| ProteanFectMax轉(zhuǎn)染試劑盒 |
PT0205 |
0.5 mL |
| ProteanFectMax轉(zhuǎn)染試劑盒 |
PT0210 |
1.0 mL |
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