Fura 2-AM
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產(chǎn)品英文名稱:Fura 2-AM
產(chǎn)品中文名稱:Fura 2-AM 鈣離子熒光探針
Fura 2-AM 鈣離子熒光探針產(chǎn)品簡介
分 子 式: C44H47N3O24
分 子 量: 1001.85
外 觀: 黃色或橙黃色粉末
別 名: Fura 2-AM
純 度: 98%以上(HPLC)
儲存條件: -20℃
運輸條件: 室溫
Fura 2-AM 鈣離子熒光探針產(chǎn)品特性
Fura 2是最常用的檢測細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光探針之一,F(xiàn)ura 2-AM(鈣離子熒光探針)需用無水DMSO(anhydrous DMSO)溶解。
Fura 2對Quin 2的熒光特性做了改進。1 μM Fura 2結(jié)合后的信號強度相當(dāng)于30 μM的Quin 2結(jié)合后的信號強度。這樣就保證在實驗中可以使用比Quin 2的濃度低得多的Fura 2指示劑。Fura 2是一種使用最廣泛的比率測量的鈣熒光指示劑。目前適用于Fura 2實驗的設(shè)備有很多,它特別適合于用數(shù)字成像顯微鏡來檢測。它比Indo 1更不易受到光褪色作用的影響。細胞形狀的改變有時候會影響340 nm和380 nm的熒光比率,比如,平滑肌收縮會同時引起這些波長的熒光信號強度的減小。另外,對于血管來說,340 nm的信號強度的增加會因為血管收縮而趨向于變小,而380 nm信號強度的減小會因為血管收縮而變大。Fura 2-AM是Fura 2的一種乙酰甲酯衍生物,通過培養(yǎng),能夠輕易地負載到細胞中。
Fura 2可以和鈣離子(Ca2+)結(jié)合,結(jié)合鈣離子后在330-350 nm激發(fā)光下可以產(chǎn)生較強的熒光,而在380 nm激發(fā)光下則會導(dǎo)致熒光減弱。這樣就可以使用340 nm和380 nm這兩個熒光的比值來檢測細胞內(nèi)的鈣離子濃度,可以消除不同細胞樣品間熒光探針裝載效率的差異,熒光探針的滲漏,細胞厚度差異等誤差因素。
Fura 2-AM是一種可以穿透細胞膜的熒光染料。Fura 2-AM的熒光比較弱,最大激發(fā)波長為369 nm,最大發(fā)射波長為478 nm,并且其熒光不會隨鈣離子濃度改變而改變。Fura 2-AM進入細胞后可以被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fura 2,從而被滯留在細胞內(nèi)。Fura 2和鈣離子結(jié)合后,最大激發(fā)波長為335 nm(最大激發(fā)波長隨離子濃度的的不同而有所不同),最大發(fā)射波長為505nm。實際檢測時推薦使用的激發(fā)波長為340nm,發(fā)射波長為510 nm。如果做雙波長檢測,則推薦使用的激發(fā)波長為340 nm和380 nm。
Fura 2-AM 鈣離子熒光探針使用注意事項
1.試劑容易吸潮,從冰箱取出后,請確認在干燥的環(huán)境放至室溫后再開封。由于試劑極其微量,開封前,請輕彈管壁幾次,以保證粉末落入管底。
2.第一次使用時, 建議母液即配即用。試劑溶解后盡可能在短時間內(nèi)使用,以保證實驗效果。
3.溶解液DMSO需要保證新鮮無水,否則將會導(dǎo)致AM體水解,使熒光染料無法進入細胞,影響實驗效果。
4.母液遇水極易分解,如果不能一次用完,建議分裝保存,例如分裝成5 μl/管,用封口膜封口,并用鋁箔紙包裹,放在一個密閉性能好的塑料袋中,并放入一包干燥劑,在≤-20℃密封避光保存。
5.建議您在正式實驗前先摸索一下細胞量、鈣離子熒光探針的終濃度、培養(yǎng)時間等,找到最佳實驗條件。
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