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免疫層析法
? ? ? ? 免疫層析(immu-nochromatography as say,ICA)是出現(xiàn)于20世紀(jì)80年代初期的一種新型的免疫分析方式,它是在免疫滲濾(immunofiltrationasay,IFA)的基礎(chǔ)上建立的一種簡單快速的免疫學(xué)檢測技術(shù)
免疫層析分類
非競爭性免疫層析:即雙抗夾心法。待測物中的某種抗體(抗原)與T線處抗原A(抗體A)以及熒光標(biāo)記的抗體B(抗原B)特異性相結(jié)合的過程,在T線處形成抗體A+抗原+抗體B(抗原A+抗
體+抗原B )的夾心結(jié)構(gòu)。?
競爭性免疫層析:待測物中的某種抗原與T(檢測線)處同種抗原競爭性地與標(biāo)記抗體相結(jié)合的過程。
免疫層析原理
雙抗體夾心法原理(以HCG為例(檢測抗原))
? ? ? ? 此方法較常用,主要用于較大分子量的蛋白(抗原)的檢測。要求兩種抗體針對一個(gè)抗原的不同位點(diǎn)才可以競爭法原理(以嗎啡為例(檢測抗原))
? ? ? ? 此方法主要用于小分子抗原(毒品、農(nóng)藥、肽鏈等)的檢測。由于抗原分子量小不能直接固定于NC膜上,常用化學(xué)方法把小分子偶聯(lián)到BSA等大分子物質(zhì)上再固定于NC膜上。此結(jié)果
與雙抗原夾心法相反,陰性CT兩條都是紅線,陽性只有C線一條紅線,T線不顯色。
?
時(shí)間分辨熒光微球
三價(jià)鑭系稀土離子銪(Eu)及其絡(luò)合物 :
?時(shí)間: 熒光衰變時(shí)間長,減少雜散光及短壽命熒光干擾;
分辨: Stock-shift 大,Ex/Em:360/615 nm, 具有更高的靈敏度
時(shí)間分辨熒光微球由空白微球經(jīng)內(nèi)部染色而得,內(nèi)部包埋稀土元素。
性能特點(diǎn)
1、內(nèi)部染色工藝、無染料表面,便于偶聯(lián)
2、粒徑均一、表面功能基團(tuán)充足,蛋白結(jié)合能力高
3、時(shí)間分辨熒光微球,稀土元素?zé)晒馊玖?,半衰期長,能更有效消除非特異性熒光干擾
4、可實(shí)現(xiàn)規(guī)?;?yīng),單批次產(chǎn)能可達(dá)50L
技術(shù)參數(shù):
材質(zhì):含有稀土元素的聚苯乙烯高分子聚合物
1、 密度:1.05g/cm3
2、分散介質(zhì):純水
3、微粒折射率:1.59(589nm波長,25℃)
4、均一度:CV<5%
5、 主要粒徑:100—400nm(其他粒徑可定制)
6、添加劑:痕量表面活性劑
7、儲存條件:2-8℃保存,切勿冷凍
標(biāo)記方法:共價(jià)的化學(xué)交聯(lián)法
檢測項(xiàng)目
心臟標(biāo)志物: NT-proBNP, cTnI, Traponin I, CK-MB, Myo
感染: PCT, CRP 凝血: D-Dimer
腫瘤標(biāo)志物: AFP, PSA
凝血: D-Dimer
糖尿病和腎臟損傷:mAlb,β2-MG, NGAL, Cys-C, HbA1c
實(shí)驗(yàn)方法
? ? ? ? 將未偶聯(lián)抗體的時(shí)間分辨熒光微球按一定濃度倍比稀釋后置于4℃冰箱,進(jìn)行16個(gè)月的關(guān)鍵性能穩(wěn)定性測試。
? ? ? ?將未偶聯(lián)抗體的時(shí)間分辨熒光微球按一定濃度倍比稀釋后置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行為期28天的加速,分別對其進(jìn)行熒光值和粒徑及均一度的測定。
產(chǎn)品信息
? ? ? ? ? 產(chǎn)品名稱? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?貨號? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?固含量? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?包裝規(guī)格
羧基時(shí)間分辨熒光微球? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? FT02C-FT05C? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 1.0%? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?1mL
羧基時(shí)間分辨熒光微球? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??FT02C-FT05C? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??1.0%? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?10mL
羧基時(shí)間分辨熒光微球? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??FT02C-FT05C? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 1.0%? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?100mL
注意事項(xiàng)
儲存條件:2-8℃保存,切勿冷凍
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