??? 自然殺傷細(xì)胞（NK cell, Natural killer cell）是一種細(xì)胞質(zhì)中具有大顆粒的細(xì)?胞，也稱(chēng)NK細(xì)胞，由骨髓細(xì)胞發(fā)育而成。因?yàn)槠浞菍?zhuān)一性的細(xì)胞毒殺作用而被命名。NK細(xì)胞主要分布于外周血中，占外周血單核細(xì)胞（PBMC）的5%～10%，淋巴結(jié)和骨髓中也存在NK細(xì)胞，水平較外周血低，但它可以消滅許多種病源體及多種腫瘤細(xì)胞。自然殺傷細(xì)胞會(huì)直接和陌生細(xì)胞接觸，并以細(xì)胞膜?破裂之方式殺死此細(xì)胞，可利用分泌穿孔素及腫瘤壞死因子，摧毀目標(biāo)細(xì)胞。目前研究認(rèn)為NK細(xì)胞特異性表達(dá)CD56，而缺乏T細(xì)胞抗原CD3。一般認(rèn)為在PBMC中分選到CD3- / CD56+的細(xì)胞即為NK細(xì)胞。

??? NK細(xì)胞屬于粒狀淋巴細(xì)胞，是先天性免疫系統(tǒng)的重要組成部分，也是機(jī)體抗御感染和防止細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的重要免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞。它對(duì)靶細(xì)胞殺傷時(shí)既不需特異性抗體參加，也不需抗原預(yù)先致敏。卻能立即發(fā)揮非特異性殺傷靶細(xì)胞的作用，尤其是對(duì)多種腫瘤細(xì)胞有迅速殺傷和溶解作用。因此，NK細(xì)胞對(duì)癌癥的監(jiān)視作用和抵抗功能已越來(lái)越受到重視。

??? NK細(xì)胞可通過(guò)多種途徑被活化，包括細(xì)胞膜表面的CD2、CD3分子和多種細(xì)胞因子。

????1.?通過(guò)CD3分子的ζ鏈

??? NK細(xì)胞不表達(dá)TCR/CD3復(fù)合物，但部分NK細(xì)胞表達(dá)CD3ζ鏈，當(dāng)用CD16抗體刺激NK細(xì)胞活化時(shí)，ζ鏈發(fā)生酪氨酸磷酸化，引起胞漿內(nèi)Ca2+濃度升高，IP3水平增加，促進(jìn)細(xì)胞因子合成和ADCC作用。

????2.?通過(guò)CD2分子

??? CD2與CD58相互作用或用CD2 McAb刺激可活化NK細(xì)胞，CD3 ζ鏈發(fā)生酪氨酸磷酸化。

????3.?自然殺傷細(xì)胞刺激因子

??? 自然殺傷細(xì)胞刺激因子（natural killer cell stimulatory factor, NKSF)對(duì)NK細(xì)胞有刺激作用。IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(leukoregulin, LR)?對(duì)NK細(xì)胞的活化和分化有正調(diào)節(jié)作用，?體外培養(yǎng)時(shí)加入上述細(xì)胞因子可明顯提高NK的殺傷活性。

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NK細(xì)胞的功能

??? 1. 自然殺傷活性，NK細(xì)胞的殺傷活性無(wú)MHC限制，不依賴(lài)抗體，可以直接通過(guò)分泌釋放穿孔素、顆粒酶、NK細(xì)胞毒性因子、TNF-α和TNF-β等對(duì)病毒感染的細(xì)胞、白血病細(xì)胞以及其他腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞毒活性，從而殺傷或者裂解靶細(xì)胞；

2. 抗病毒感染，NK可選擇性地殺傷病毒感染的靶細(xì)胞。由輔佐細(xì)胞或NK細(xì)胞所產(chǎn)生的IFN可協(xié)同NK的抗病毒作用，而對(duì)正常細(xì)胞有保護(hù)作用。另一方面，病毒感染細(xì)胞表面的病毒抗原和其它表面分子使得其對(duì)NK細(xì)胞的殺傷作用變得更加敏感。此外，NK細(xì)胞在體外還可殺傷某些細(xì)菌、真菌、原蟲(chóng)等，可能與NK細(xì)胞釋放某些殺傷介質(zhì)有關(guān)。

3. NK細(xì)胞在免疫監(jiān)視、殺傷突變的腫瘤細(xì)胞可能比T細(xì)胞具有更重要的作用。某些疾病如Chediak-Higashi或X性聯(lián)淋巴增殖綜合征患者，由于NK功能缺陷對(duì)惡性淋巴細(xì)胞增殖疾病特別易感。

4. 參與骨髓移植后移植物抗白血病效應(yīng)：在體外NK細(xì)胞可殺傷某些淋巴樣和髓樣白血病細(xì)胞。骨髓移植后數(shù)周內(nèi)，來(lái)自供體的NK細(xì)胞在PBL中占相當(dāng)高的比例。此外，在體內(nèi)NK細(xì)胞還可殺傷某些不成熟細(xì)胞如骨髓干細(xì)胞、胸腺細(xì)胞亞群等。

????治療流程：

確定患者的入選標(biāo)準(zhǔn)→相關(guān)檢查→血液采集→分離外周血單個(gè)核細(xì)胞→培養(yǎng)NK細(xì)胞→獲得NK細(xì)胞→細(xì)胞回輸→療效評(píng)估→隨訪(fǎng)

培養(yǎng)方法：

1、治療前檢查血常規(guī)、凝血功能等常規(guī)項(xiàng)目；

2、用血液分離機(jī)采集病人外周血淋巴細(xì)胞或直接采集外周血；

3、在GMP實(shí)驗(yàn)室里，從采集的外周血中分離出單個(gè)核細(xì)胞，經(jīng)多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)、激活后進(jìn)行增殖培養(yǎng)，此過(guò)程需要9-12天。

4、于培養(yǎng)的第9-13天開(kāi)始分次回輸NK細(xì)胞，每次回輸過(guò)程大概1.5個(gè)小時(shí)。

5、一個(gè)療程約14-16天。此后視情況進(jìn)行下一療程治療。

??? 1、可直接識(shí)別、殺死癌細(xì)胞，抑制腫瘤的生長(zhǎng)及擴(kuò)散；

2、可直接改善和調(diào)節(jié)患者的免疫力和神經(jīng)系統(tǒng)；

3、通過(guò)其分泌的因子抑制腫瘤附近新血管的增生，限制腫瘤生長(zhǎng)；

4、分泌多種細(xì)胞因子，減少患者疼痛，提高生活品質(zhì)；

5、NK細(xì)胞療法可用于多種癌癥，尤其對(duì)血液腫瘤，肺癌、淋巴癌、食道癌、乳癌、肝癌等血流旺盛且血管較密集的腫瘤有很好的療效。

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