產品英文名稱：Calcein-AM
產品中文名稱：Calcein-AM 細胞染色劑

Calcein-AM 產品簡介
分 子 式: C46H46N2O23
分 子 量: 994.86
外      觀: 白色或淺黃色晶體
別      名: 鈣黃綠素
純      度: 90%以上（HPLC）
儲存條件: -20℃
運輸條件: 室溫

Calcein-AM 產品描述
Calcein-AM是一種可對活細胞進行熒光標記的細胞染色試劑，由于它在Calcein的基礎上加強了疏水性，因此能夠輕易穿透活細胞膜。當其進入到細胞質后，酯酶會將其水解為Calcein留在細胞內，發(fā)出強綠色熒光。與其它同類試劑(如BCECF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate) 相比，Calcein-AM是最適合作為熒光探針去染活細胞的，因為它的細胞毒性很低。Calcein不會抑制任何的細胞功能如增殖或淋巴球的趨化性。使用了Calcein的活性檢測的實驗結果是十分可信并且與標準的51Cr-釋放法所得結果相一致的。Calcein的激發(fā)和發(fā)射波長分別為490 nm和515 nm。
Calcein-AM可與PI結合使用，分別對活細胞和死細胞染色，可用于同時對活細胞和死細胞進行熒光染色。

Calcein-AM 產品特性
Calcein-AM是一種可對活細胞進行熒光標記的細胞染色試劑，Calcein-AM由于在Calcein(鈣黃綠素)的基礎上加強了疏水性，因此能夠輕易穿透活細胞膜。當其進入到細胞質后，酯酶會將其水解為Calcein(鈣黃綠素)留在細胞內,發(fā)出強綠色熒光。與其它同類試劑（如BCECF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate）相比，Calcein-AM是最適合作為熒光探針去染活細胞的，因為它的細胞毒性很低。Calcein(鈣黃綠素)不會抑制任何的細胞功能如增殖或淋巴球的趨化性。另外，使用了Calcein(鈣黃綠素)的活性檢測的實驗結果是十分可信并且與標準的51Cr-釋放法所得結果相一致的。Calcein(鈣黃綠素)的激發(fā)和發(fā)射波長分別為490 nm和515 nm。
Calcein-AM和碘化丙啶（PI）溶液，它們分別可對活細胞和死細胞染色。Calcein-AM的乙酸甲基酯親脂性很高，使其可透過細胞膜，通過活細胞內的酯酶作用，Calcein-AM能脫去AM基，產生的Calcein(鈣黃綠素)能發(fā)出強綠色熒光，因此Calcein-AM僅對活細胞染色。另一方面，作為核染色染料的PI不能穿過活細胞的細胞膜。它穿過死細胞膜的無序區(qū)域而到達細胞核，并嵌入細胞的DNA雙螺旋從而產生紅色熒光（激發(fā)：535 nm，發(fā)射：617 nm），因此PI僅對死細胞染色。由于Calcein(鈣黃綠素)和PI-DNA都可被490 nm激發(fā)，因此可用熒光顯微鏡同時觀察活細胞和死細胞。用545 nm激發(fā)，僅可觀察到死細胞。根據(jù)以上特點，Calcein-AM和碘化丙啶（PI）經常被結合用來作為活細胞和死細胞的雙重染色。
由于不同細胞系的最佳染色條件不同，我們建議個別確定Calcein-AM和PI的合適濃度。

Calcein-AM 使用注意事項
1、試劑容易吸潮，從冰箱取出后，請確認在干燥的環(huán)境放至室溫后再開封。由于試劑極其微量，開封前，請輕彈管壁幾次，以保證粉末落入管底。
2、第一次使用時, 建議母液即配即用。試劑溶解后盡可能在短時間內使用，以保證實驗效果。
3、溶解液DMSO需要保證新鮮無水，否則將會導致AM體水解，使熒光染料無法進入細胞，影響實驗效果。
4、母液遇水極易分解，如果不能一次用完，建議分裝保存，例如分裝成5 μl/管，用封口膜封口，并用鋁箔紙包裹，放在一個密閉性能好的塑料袋中，并放入一包干燥劑，在≤-20℃密封避光保存。
5、建議您在正式實驗前先摸索一下細胞量、染色試劑的終濃度、培養(yǎng)時間等，找到最佳實驗條件。