DIG High Prime DNA Labling and Detection Starter Ⅱ
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產(chǎn)品英文名稱:DIG High Prime DNA Labling and Detection Starter Ⅱ
產(chǎn)品中文名稱:地高辛標(biāo)記DNA和檢測試劑盒Ⅱ
地高辛標(biāo)記DNA和檢測試劑盒Ⅱ 產(chǎn)品介紹:
高效地高辛(DIG)標(biāo)記探針可應(yīng)用于RNA雜交,DNA雜交,點(diǎn)雜交分析等,同時也可用于克隆和噬菌斑雜交。試劑盒使用DIG-11-dUTP(堿不穩(wěn)定性)隨機(jī)引物標(biāo)記DNA模板并對DIG標(biāo)記雜交物進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測。試劑盒備有即開即用的CSPD發(fā)光底物,現(xiàn)有的封閉液和DIG易雜交顆粒。高效DIG混合物包含穩(wěn)定Klenow enzyme(克列諾酶),核苷酸,引物和反應(yīng)緩沖液。與第一代相比具有更高的準(zhǔn)確性、更好的靈敏度、操作時間更短等特點(diǎn),是非放射性高效標(biāo)記與檢測技術(shù)的首選,被廣泛地應(yīng)用于各種膜雜交及原位雜交技術(shù)中。
檢測原理: 高效DNA地高辛標(biāo)記和檢測試劑盒II是用地高辛(Digoxigenin ,簡稱DIG;又稱異羥基洋地黃毒甙元,是一種類固醇半抗原分子)標(biāo)記的DNA探針,應(yīng)用于分子雜交和隨后的化學(xué)發(fā)光檢測。羅氏公司的該試劑盒檢測主要分三階段進(jìn)行:1)DNA標(biāo)記:根據(jù)隨機(jī)引物標(biāo)記技術(shù),生成DIG地高辛標(biāo)記的DNA探針。2)雜交:按照標(biāo)準(zhǔn)雜交方法進(jìn)行,將地高辛標(biāo)記的DNA探針用于核酸點(diǎn)雜交,可選擇帶正電的尼龍膜或純硝酸纖維素膜作為雜交膜。3)免疫學(xué)檢測:首先將標(biāo)記有AP的地高辛抗體與雜交探針免疫結(jié)合;然后在477nm波長下,通過檢測堿性磷酸酶與CSPD底物產(chǎn)生的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的數(shù)值,從而達(dá)到免疫檢測的目的。
高效率DIG引物標(biāo)記優(yōu)點(diǎn):進(jìn)一步提高標(biāo)記效率,質(zhì)粒、柯斯質(zhì)粒和噬菌體DNA,線狀或超螺旋DNA均可作為模板,都具有同樣的標(biāo)記效率。
產(chǎn)品組成成份:
? DIG-High Prime, 5x conc., 50 μl
? DIG-labeled Control DNA, 20 μl, (5 μg/ml) pBR328 (linearized with Bam HI)
? DNA Dilution Buffer, 3 x 1 ml
? Anti-digoxigenin-AP Conjugate, 50 μl
? CSPD, ready-to-use, 50 ml
? Blocking Solution, 10x conc., 4 x 100 ml
? DIG Easy Hyb Granules, 4 x 100 ml
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