產(chǎn)品名稱：Beyotime RIPA裂解液(強(qiáng))

產(chǎn)品貨號(hào)：P0013B

英文名稱：RIPA Lysis Buffer

產(chǎn)品規(guī)格：100ml

產(chǎn)品介紹：

碧云天生產(chǎn)的RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的PAGE、Western、免疫沉淀(immunol precipitation，IP)、免疫共沉淀(co-IP)和ELISA等。

本產(chǎn)品可以用于動(dòng)物、植物的細(xì)胞或組織樣品，也可以用于真菌或細(xì)菌樣品。RIPA裂解液的配方有很多種，根據(jù)其裂解液的強(qiáng)度大致可以分為強(qiáng)、中、弱三類。

RIPA裂解液(強(qiáng))的主要成分為50mM Tris(pH 7.4)，150mM NaCl，1% Triton X-100，1% sodium deoxycholate，0.1% SDS，以及sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多種抑制劑?？梢杂行б种频鞍捉到?。

產(chǎn)品應(yīng)用：

本產(chǎn)品可以用于動(dòng)物、植物的細(xì)胞或組織樣品，也可以用于真菌或細(xì)菌樣品的組織裂解。

產(chǎn)品使用說明：

a.把組織切成細(xì)小的碎片。

b.融解RIPA裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF，使PMSF的最終濃度為1mM，或者根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要加入適當(dāng)?shù)纳鲜龅鞍酌噶姿崦敢种苿┗旌衔铩?/p>

c.按照每20毫克組織加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量。)

d.用玻璃勻漿器勻漿，或使用碧云天生產(chǎn)的E6600 TissueMaster?手持式組織研磨儀研磨，直至充分裂解。也可以把組織樣品冷凍后液氮研磨，研磨充分后加入裂解液進(jìn)行裂解。

e.充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。每20mg凍存的小鼠肝臟組織用200微升本裂解液裂解后獲得的上清，其蛋白濃度約為15-25mg/ml，不同狀態(tài)的不同組織有所不同。

f.如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過強(qiáng)烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便，不必使用勻漿器或研磨設(shè)備，缺點(diǎn)是不如勻漿或研磨那樣裂解得比較充分。

注：RIPA裂解液的裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物，屬正?，F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復(fù)合物。在不檢測(cè)和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下，可以直接離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)；如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白，則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物，隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果檢測(cè)一些常見的轉(zhuǎn)錄因子，例如NF-kappaB、p53等時(shí)，通常不必進(jìn)行超聲處理，就可以檢測(cè)到這些轉(zhuǎn)錄因子。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.特殊的抗氧化劑有效地抑制樣品在檢測(cè)過程中產(chǎn)生新的MDA，使檢測(cè)更加準(zhǔn)確。同時(shí)本檢測(cè)試劑盒在檢測(cè)過程中可以把部分MDA天然形成的聚丙二醛分解成MDA，使對(duì)脂質(zhì)氧化的測(cè)定更加準(zhǔn)確。

2.本試劑盒可以檢測(cè)低達(dá)1μM的MDA，也可檢測(cè)高達(dá)200μM的MDA在本試劑盒的檢測(cè)范圍內(nèi)，可以直接用本試劑盒檢測(cè)血漿、血清、尿液樣品等。

保存條件：

-20℃保存，一年有效。

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

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關(guān)于公司：

Beyotime創(chuàng)辦于2001年。近20年來專注于自主研發(fā)和生產(chǎn)。2007年成立上海碧云天生物技術(shù)有限公司，為特新“小巨人”企業(yè)，并進(jìn)一步入選第二批第一年建議支持的專精特新“小巨人”企業(yè)， 也是G60科創(chuàng)走廊一類重點(diǎn)扶持企業(yè)和上海市專精特新中小企業(yè)。江蘇碧云天為江蘇省高新技術(shù)企業(yè)，南通市雙創(chuàng)優(yōu)企。公司主要研發(fā)生產(chǎn)生物、醫(yī)學(xué)研究用試劑、試劑盒、消耗品和儀器設(shè)備。

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