PicoPLEX?WGA kit
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PicoPLEX WGA 試劑采用專利技術(shù),適用array CGH分析及PCR平臺。PicoPLEX技術(shù)被試管嬰兒行業(yè)供應(yīng)商如BlueGnome信賴用于胚胎植入前遺傳學(xué)篩查。
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產(chǎn)品英文名稱:PicoPLEX?WGA kit
產(chǎn)品中文名稱:PicoPLEX單細胞全基因組擴增試劑盒
用途:單細胞或微量基因組DNA樣本擴增
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PicoPLEX?WGA kit采用專利技術(shù),設(shè)計、優(yōu)化用于從單細胞中擴增單拷貝基因組DNA。起始量低至單細胞或6pg基因組DNA。便捷的單管操作流程減少失誤,節(jié)省時間并降低反應(yīng)背景。適合胚胎植入前遺傳學(xué)篩查基因組文庫的構(gòu)建。
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Reproducible results from single cells (or <15 pg DNA)
Superior reproducibility of allele representation
Easy to use and automate
Unambiguous results at all resolutions, microarray, and PCR
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Store at -20 °C.Guaranteed for 12 months at -20°C in a constant temperature freezer.
CAT. NO. R30050 PicoPLEX? WGA Kit, 50 reactions
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PicoPLEX特點
可以單細胞(或<15 pg DNA)起始,生成足夠量的基因組樣品用于下游分析
易于使用和自動化,單個反應(yīng)管、3小時,3步反應(yīng)的簡單操作流程
獲得可重復(fù)結(jié)果
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PicoPLEX應(yīng)用
拷貝數(shù)變異分析-CNV(aCGH)
單核苷酸多態(tài)性分型-SNP
基因突變篩查-PCR
不能直接應(yīng)用NGS,PicoPLEX DNA-seq Kit可以直接應(yīng)用NGS。
PicoPLEX技術(shù)是胚胎植入前基因篩查胚細胞WGA的金標準。被世界范圍內(nèi)的PGS系統(tǒng)和服務(wù)機構(gòu)廣泛使用。
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技術(shù)原理
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PicoPLEX技術(shù):單細胞在單管或單孔中裂解。在預(yù)擴增過程中,特殊隨機引物與基因組DNA結(jié)合延伸,形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)文庫,在接下來的擴增中,只有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的文庫被擴增。
技術(shù)優(yōu)勢:利用特殊隨機引物(Quasi-random primer)引發(fā)線性擴增進行全基因組擴增。
相比于以往的PCR、MDA、MALBC為基礎(chǔ)的單細胞全基因組擴增技術(shù),操作簡單快速。擴增最大優(yōu)勢:再現(xiàn)性良好。
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PicoPLEX WGA Kit適用樣本
1.1-10個人細胞,如:囊胚細胞、極體、滋胚層細胞、羊水細胞、循環(huán)腫瘤細胞、培養(yǎng)細胞等。
2.1000-10000個細菌細胞
3.分離DNA(15pg-50pg人DNA)
4.分選染色體(Sorted Chromosomes )
5.不完整或片段化,單/雙鏈DNA
6.樣本最大體積:5μL
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產(chǎn)品組成—PicoPLEX WGA Kit 單細胞全基因組擴增試劑盒
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組份 |
蓋子顏色 |
Cell Extraction Buffer 細胞提取緩沖液 |
綠色 |
Extraction Enzyme Dilution Buffer 提取酶稀釋緩沖液 |
紫色 |
Cell Extraction Enzyme 細胞提取酶 |
黃色 |
Pre-Amp Buffer 預(yù)擴增緩沖液 |
紅色 |
Pre-Amp Enzyme 預(yù)擴增酶 |
白色 |
Amplification Buffer 擴增緩沖液 |
桔色 |
Amplification Enzyme 擴增酶 |
藍色 |
Nuclease-Free water 無核酸酶水 |
無色 |
User Manual 使用手冊 |
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操作流程
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單管,三步。在1個PCR管或微孔中3個小時即可完成。無需樣品純化和轉(zhuǎn)移過程,降低了樣品損失,避免了操作污染和操作誤差。
單細胞擴增再現(xiàn)性良好
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(橫軸:反應(yīng)循環(huán),縱軸:強度)
腫瘤細胞經(jīng)流式細胞術(shù)分選后,采用PicoPLEX WGA Kit 擴增。每個細胞(藍色曲線)擴增比率相同,并且預(yù)期產(chǎn)量相同。不含細胞的樣品(綠色曲線;空白模板對照)顯示非常低的背景。
適用CNV分析
CNV(拷貝數(shù)變異)分析:單個卵裂球樣品采用PicoPLEX WGA Kit擴増,標記后與BlueGnome?24sure??arrays雜交(Genesis Genetics Institute),結(jié)果清晰地顯示了拷貝數(shù)變異。2011年ESHRE (歐洲人類生殖與胚胎學(xué)會)的臨床實驗證明了采用PicoPLEX 技術(shù)進行人類染色體核型分析的準確性。
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名詞解釋
PGS/PGD:植入前基因篩查和診斷(PGS,PGD)指體外受精(IVF)過程中所做的胚胎或卵母細胞測試,以便選擇沒有染色體變異或帶有家族遺傳疾病等位基因的胚胎,提高懷孕成功率,降低特定遺傳病的傳遞風險。
array CGH:微陣列比較基因組雜交。微陣列分析是IVF機構(gòu)最常用的PGS技術(shù)。
NGS:新一代高通量測序。
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