瓊脂糖凝膠電泳常用于分離、鑒定?DNA、RNA 分子混合物，以瓊脂凝膠作為支持物，利用?DNA 分子在電場中時的電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng)，達(dá)到分離混合物的目的。DNA 分子在高于其等電點(diǎn)的溶液中帶負(fù)電，在電場中由陰極向陽極運(yùn)動。在一定的電場強(qiáng)度下，忽略DNA分子攜帶的電荷，DNA 分子的遷移速度取決于分子篩效應(yīng)，即分子本身的大小和構(gòu)型是主要的影響因素。DNA 分子的遷移速度與相對分子量成反比。

不同構(gòu)型的?DNA 分子的遷移速度不同。如環(huán)形?DNA 分子樣品，其中有三種構(gòu)型的分子：超螺旋分子（cccDNA）、開環(huán)分子(ocDNA)、和線形?DNA 分子(IDNA)。這三種不同構(gòu)型分子進(jìn)行電泳時的遷移速度大小順序為:cccDNA＞IDNA＞ocDNA。

核酸電泳通常使用瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠兩種介質(zhì)。瓊脂糖是一種聚合鏈線性分子；聚丙烯酰胺凝膠由丙烯酰胺（Acr）在?N,N,N′-四甲基乙二an（TEMED）和過硫酸胺（AP）的催化下聚合形成長鏈，并通過交聯(lián)劑?N,N′-亞甲雙丙烯酰胺（Bis）交叉連接而成。瓊脂糖凝膠適合分離200bp至近50kb的DNA片段，而聚丙烯酰胺凝膠對于小片段（5bp-500bp）的分離效果很好，且分辯力極高。選擇不同濃度的凝膠，可以分離不同大小范圍的?DNA 分子。電場強(qiáng)度愈大，帶電顆粒的運(yùn)動越快。但凝膠的有效分離范圍隨著電壓增大而減小，所以電泳時一般采用低電壓，不超過?6V/cm。而對于大片段電泳，可以選擇?0.5-1.0V/cm 電泳過夜。如果選擇高電壓電泳，可使用聚丙烯酰胺凝膠。

步驟我就不多說啦，下面來看看常見的問題有哪些。

眾所周知，Lonza是世界上久負(fù)盛名的瓊脂糖源生產(chǎn)商，其所產(chǎn)瓊脂糖質(zhì)量上乘、暢銷全球，深受工業(yè)生產(chǎn)和科研用戶的歡迎。選擇正確的瓊脂糖就等于配了一把保險鎖，幫助您把實驗誤差降至，實驗結(jié)果更漂亮，更重要的是降低您的實驗成本！

SeaKem? Gold Agarose是一種高凝膠強(qiáng)度，低EEO（電滲），標(biāo)準(zhǔn)凝膠溫度的瓊脂糖。SeaKem? Gold Agarose瓊脂糖屬于遺傳技術(shù)級別，?適用于在脈沖場凝膠電泳實驗（PFGE）中快速分離巨大堿基對DNA。低電滲性能使得其在凝膠電泳實驗中DNA電泳遷移率明顯大于使用傳統(tǒng)瓊脂糖，調(diào)節(jié)緩沖液和瓊脂糖濃度可以使跑膠時間減少一半。高凝膠強(qiáng)度使其在低濃度時很容易操作，能夠使用傳統(tǒng)電泳分離大DNA片段，減少分離?DNA片段時間（PFGE）。

產(chǎn)品名稱：SeaKem? Gold瓊脂糖粉

產(chǎn)品貨號：50150

?

性能

• 高凝膠強(qiáng)度；
• 低EEO（電滲）≤05
• 脈沖場凝膠電泳中可分離DNA50kb-10Mb
• 垂直電泳中可快速分離DNA30kb-50kb

?關(guān)于這些參數(shù)的內(nèi)涵：?

1. 凝膠強(qiáng)度：衡量瓊脂糖性能的關(guān)鍵參數(shù)，凝膠強(qiáng)度越高，凝膠性能越好，可以保證在低濃度下，凝膠性能依然很好，高凝膠強(qiáng)度瓊脂糖適合大分子核酸。SeakemGold?Agarose?凝膠強(qiáng)度高，可在0.3%、0.5%的濃度下分離超大片段核酸。

2. 低電滲（LowEEO）：電滲是一種物理現(xiàn)象，由于瓊脂糖這樣的多孔支持物在電場中會吸附水中的正負(fù)離子，而使溶液帶電向電極泳動，從而干擾核酸或蛋白電泳，?Lonza??Seakem ?Gold ?Agarose金瓊脂糖是低電滲≤0.05，幾乎不干擾核酸電泳。

應(yīng)用：

• 分析長片段PCR 產(chǎn)物
• 分離和進(jìn)一步操作DNA?>1,000?bp
• DNA& RNA?的分析電泳
• DNA & RNA印跡

產(chǎn)品參數(shù)：

? Gelling temperature (1.5%) ――36°C ±1.5°C

? Melting temperature (1.5%)―― >90°C

? Gel strength (1%)―― >1,800 g/cm2

? Gel strength (1.5%)―― >3,500 g/cm2

產(chǎn)品貨號????????產(chǎn)品名稱

50111 SeaPlaque GTG AGAROSE瓊脂糖粉?25G

50110 SeaPlaque GTG AGAROSE瓊脂糖粉?125G

50091??NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉?25g

50090??NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉?125g

50094??NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉?500g

50101 SeaPlaque AGAROSE瓊脂糖粉?25G

50100 SeaPlaque AGAROSE瓊脂糖粉?125G

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