細胞外囊泡(ev)是細胞分泌的納米顆粒,主要參與細胞間通訊過程。在過去的幾年里,EV獲得了越來越多的興趣從科學界,成為一個多學科的研究領域。電動汽車具有由于納米尺寸和生物活性含量所產(chǎn)生的獨特的物理化學性質(zhì)。EV能夠跨越多種生物屏障,比如細胞膜和血腦屏障,它們參與了許多病理過程?;谶@些原因,EV前景廣闊,應用于藥物靶點、治療藥物、生物標志物和給藥載體。
將EV用于科學和醫(yī)療應用的一個主要挑戰(zhàn)是隔離過程,因為EV可以在各種復雜的生物基質(zhì)中找到,這些基質(zhì)是由大量的在尺寸和密度上重疊的納米生物材料。
常用的隔離技術ev與其他流體組分的分離是超離心法(UC),即密度梯度(DG),阻垢層析(SEC)。然而,這些方法可能是有限的輸入量、時間消耗和電動汽車產(chǎn)量。例如UC協(xié)議能夠處理體積較大(可達1.5 L),但回收率較低[15,16],且耗時較長離心步驟,經(jīng)常破壞EV,并引起共沉淀污染物。雖然DG和SEC通常會產(chǎn)生純度高的EV配方,這些方法耗費時間,導致低收益,并且需要較小的體積(小于
5毫升)。此外,上述方法的臨床實際操作具有挑戰(zhàn)性臨床級生產(chǎn)的無菌和放大要求。因此,改進技術能夠以可擴展、可再生和無菌的方式濃縮EV,這對未來是必要的臨床翻譯。
在過去的幾年里,用于純化合成納米粒子、蛋白質(zhì)、液體懸浮液中的病毒也被用于EV分離。這些新興EV的分離方法主要是利用抗原-抗體結合親和力、高性能液體色譜法或過濾。例如,場流分餾(FFF)]和非對稱流場流分餾(AF4)依賴于作用于流經(jīng)的液體懸浮液的場管式過濾器。切向流過濾是另一種新興的耦合滲透技術
膜過濾和流動,以從膠體基質(zhì)中獲得有效濃度的ev。
切向流動過濾(TFF)不同于傳統(tǒng)的終端過濾,因為流體是切向流動的以避免濾餅的形成。事實上,通過終端過濾,較大的顆粒通常會堵塞膜孔,導致顆粒分離受損這是基于原始孔隙大小。TFF被評價為一種基于大小的EV濃度方法,能夠處理可伸縮量的生物液體。UC和TFF的并行比較處理大量的條件細胞培養(yǎng)基進行。最后,TFF的能力為了處理從病人抽脂液中提取的液體進行了評估。在各種臨床相關的生物基質(zhì),脂肪組織尤其相關。脂肪組織調(diào)節(jié)多種代謝過程和是一個來源間充質(zhì)干細胞分泌廣泛的選擇可溶性因子和具有再生特性的.
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