Cholesterol plaque in blood vessel, 3D illustration

所以，推測產(chǎn)生的治療作用可能是依賴于旁分泌機制產(chǎn)生的大量生物活性因子。大多數(shù)健康或疾病環(huán)境的細胞能夠持續(xù)釋放細胞外囊泡（extracellular vesicles，EV）進入周圍環(huán)境，其中外泌體作為細胞間進行信息交流的重要工具有望替代干細胞移植。

MSC?來源的外泌體已進入臨床試驗階段，主要針對急性缺血性腦中風(fēng)、難治性黃斑孔裂、1?型糖尿病和阿爾茨海默癥。因此，對外泌體的培養(yǎng)方法和相關(guān)參數(shù)、分離方法進行改進和優(yōu)化，對其蛋白質(zhì)和核酸進行嚴(yán)格分析均是其應(yīng)用于臨床的基礎(chǔ)。

1983?年，Johnstone?等首次在綿羊網(wǎng)織紅細胞中發(fā)現(xiàn)外泌體，但一直被認為是一種細胞廢棄物。2010?年?MSC?來源外泌體首次在心肌缺血/再灌注損傷模型中被研究。研究表明，骨髓?MSC?比成肌細胞、人急性單細胞白血病細胞系（THP-1）、人胚胎腎細胞系（HEK）等能產(chǎn)生更多的外泌體。

體外培養(yǎng)人 MSC 外泌體的臨床應(yīng)用研究

MSC?來源于發(fā)育早期的中胚層和外胚層，屬于多功能干細胞，其具有多向分化潛能、造血支持、免疫調(diào)控和自我復(fù)制等特點，是干細胞家族的重要成員，存在于骨髓、肝臟、脾臟、成人的骨骼肌、外周血、脂肪、韌帶、胎盤、臍帶、臍血、皮膚等組織中。2006?年國際間充質(zhì)及組織干細胞委員會對人來源?MSC?實驗研究提出?3?條最低鑒定標(biāo)準(zhǔn)：

①在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下，MSC?必須具備對塑料底物的貼附特性；

②通過流式細胞儀檢測，MSC?群體表達?CD105、CD73及?CD90?陽性率?≥?95%，且?CD45、CD34、CD14?或CD11b、CD79a?或?CD19、HLA-DR?的陰性表達率?≥?98%；

③在體外，通過標(biāo)準(zhǔn)方法誘導(dǎo)，MSC?必須能向成骨細胞、脂肪細胞及軟骨細胞分化。

臨床試驗中可能需要數(shù)百微克至毫克的外泌體來治療患者，原代?MSC?數(shù)量很少，可以通過體外擴增培養(yǎng)，控制培養(yǎng)微環(huán)境來增加外泌體的產(chǎn)量和誘導(dǎo)有效成分的高表達。

目前常用的培養(yǎng)細胞產(chǎn)生?EVs?體系有?2D?培養(yǎng)體系、3D?培養(yǎng)體系（包括支架和無支架）和生物反應(yīng)器。3D?培養(yǎng)體系可以彌補傳統(tǒng)?2D?培養(yǎng)體系在生理模式方面的缺失，但?3D?培養(yǎng)體系其支架組成會影響?EVs?的數(shù)量和質(zhì)量，且更難去評估，再現(xiàn)性和可伸縮性也應(yīng)該被考慮，EVs的分離需要用酶進行消化，會影響?EV?的完整性和生物活性。生物反應(yīng)器的優(yōu)點在于?EV?的產(chǎn)量大，且在動態(tài)條件下培養(yǎng)，可以增強生物反應(yīng)系統(tǒng)內(nèi)的營養(yǎng)交換，但也必然會給?EV?的功能和特性帶來影響，例如，細胞接種的密度、老化程度、增殖代數(shù)、分化的不同時期、培養(yǎng)基基質(zhì)的形貌、剛性、流體剪切應(yīng)力以及周期性拉伸等細胞培養(yǎng)微環(huán)境下的因素均會對?EV?產(chǎn)生影響。細胞接種密度過大，會產(chǎn)生接觸抑制。

目前仍存在很多問題如外泌體提取的純度和產(chǎn)量、治療疾病的作用機理不明確以及攜帶的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、mRNA 和miRNA 是否會對人體產(chǎn)生其他危害等等。盡管有諸多限制條件,MSC-Ex 在疾病的治療方面仍然具有廣泛的研究價值和應(yīng)用前景。

推薦產(chǎn)品

更多產(chǎn)品信息請聯(lián)系中國授權(quán)代理商

華雅思創(chuàng)生物

讓你的實驗無憂!

再也不擔(dān)心細胞培養(yǎng)難了!

讓養(yǎng)細胞，變得so easy!

歡迎您的來電咨詢

客服熱線：400-021-2200

聯(lián)系方式：150 ?2101 ?0459

Q??Q:?3331955465

華雅思創(chuàng)生物公司為您提供：上千種的現(xiàn)貨生物產(chǎn)品，數(shù)百萬元的現(xiàn)貨庫存，歡迎您前來咨詢和購買！